Molecular Weight Determination of L-asparaginase from Bacillus licheniformis
Dr. Vivian Ramzi Daifallah*1, Dr. Sabah Nassib Yazji2, Dr. Lina Abdulkarim Al-Amir1
1 National Commission for Biotechnology (NCBT) | Syria
2 Faculty of Agriculture | Damascus University | Syria
Abstract: Due to the nutritional and pharmaceutical application importance of the asparaginase enzyme and the lack of commercial availability of the enzyme in local markets, the study focused on producing the asparaginase enzyme from Bacillus bacteria and purifying it for the possibility of its application in the food industries.
,Purification steps of asparaginase produced by Bacillus licheniformis started by precipitation with 80% acetone, then separation by column chromatography using Sephadex G-100 and Sephacryl DEAE-sepharose. The molecular weight was 34.4 kDa determined using SDS PAGE.
Keywords Bacillus licheniformis– asparagine –asparaginase -enzyme activity – purification- molecular wight – Sephadex G100 – DEAE sepharose.
تحديد الوزن الجزيئي للأسبارجيناز المنتج من بكتريا Bacillus licheniformis
د. فيفيان رمزي ضيف الله*1, د. صباح نسيب يازجي2, د. لينه عبد الكريم الأمير1
1 الهيئة العامة للتقانة الحيوية | سورية
2 كلية الزراعة | جامعة دمشق | سورية
المستخلص: نظراً للأهمية التطبيقية الغذائية والدوائية لإنزيم الأسبارجيناز ولعدم توفر الإنزيم تجارياً في الأسواق المحلية، اتجهت الدراسة نحو إنتاج إنزيم الأسبارجيناز من بكترياBacillus وتنقيته لإمكانية تطبيقه في الصناعات الغذائية . أجريت عملية التنقية لإنزيم الأسبارجيناز المنتج من بكتريا Bacillus licheniformis
بدءاً من الترسيب بالأسيتون بتركيز 80% ثم باستخدام عمود الترشيح الهلامي Sephadex G-100 وعمود كروماتوغرافيا التبادل الأيوني DEAE-Sepharose. بلغ الوزن الجزيئي 34.4 كيلو دالتون عند استخدام هلام SDS-PAGE.
الكلمات المفتاحية: Bacillus licheniformis ،أسبارجين، أسبارجيناز، فعالية إنزيمية ، تنقية، وزن جزيئي ، Sephadex G100 ، DEAE Sepharose.